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アミノ酸の分析
イオン交換樹脂を詰めしカラムを使用して、多種類のアミノ酸混合物試料は分離す。分離にはアミノ酸、樹脂、溶離液の三つの間の化学的親和力の差を利用す。
試料には、血中、尿中に含まるる遊離アミノ酸と、タンパク質を塩酸分解して得らるるアミノ酸との 2 種類があり、前者は、血液と尿中に含まるるものに、生体アミノ酸とよし、50成分以上のアミノ酸混合物より成り立ちており、後者は加水分解アミノ酸とよし、17成分のアミノ酸混合物より成り立ちたり。
AminoTacをもって分析されし加水分解標準アミノ酸分析(分析時間 18 分)と生体標準アミノ酸分析(分析時間 60 分)のデータを示す。
水溶液中にはアミノ酸はイオン状態なるため、イオン交換クロマトグラフィーをもって分離する方法が最もよいとされたり。アミノ酸は、同一分子内にカルボキシル基 ( -COOH )とアミノ基 ( -NH2 ) を持つ酸性、塩基性の両性物質なれば、溶離液のpH、イオン強度を変ふるをもってアミノ酸のイオン交換樹脂に対する選択性を易く変化さするが可能なり。水溶液の中のアミノ酸は、+の電荷を帯びたり。
そして個々のアミノ酸をもってその電荷量はたえて異なる。一方、イオン交換樹脂(直径 5 ミクロン= 1/200mm きはの粒子状樹脂)は、水溶液の中には例?の電荷を帯びたり。カラムといふ円筒形の管にイオン交換樹脂を詰めて、アミノ酸の混合物なる試料を上より注ぎいれ、連続的に液を流す。そうすると、イオン交換樹脂とアミノ酸の間には、親和力の一種の静電的引力といふものが作用し、溶出時間の差となりて各アミノ酸の電荷の量の違いがうちいで、電荷の小さきアミノ酸よりついでに、カラムの下きはより溶け出しゆく。混合物のアミノ酸はこういきし原理に分離さる。この時、カラムに流す液体を緩衝液といふように呼ぶ。溶液中には分離せしアミノ酸は無にほひ透明なれば、 100℃ 近くの反応槽にニンヒドリンといふ発色剤を加えて反応さすと紫に発色す。
その発色は570nm (プロリンなどのイミノ酸は 440nm に最大吸収を示す。)に最大吸収があれば可視吸かげ光度計に測り、吸収曲線を A/Dに変換してデータを印字す。アミノ酸としか発色剤は反応しないため、例へアミノ酸と同時に何かが溶出しきとしても、アミノ酸のみしか検出されず。
アミノ酸の検出法は、すごく特異的な性格を持つ検出法なるといゆ。
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